近日，“HBsAg突变全球多中心研究解读媒体会”在沪举行。台湾大学医学院高嘉宏教授、国家卫计委临床检验中心王露楠教授探讨了表面抗原（HBsAg）突变对临床及实验室检测带来的挑战和影响，HBsAg突变全球多中心研究负责人、罗氏诊断全球医学科学事务部Mikael Gencay博士则分享了该研究成果。

提高HBsAg突变检出率

尽早发现隐匿性HBV感染患者

超螺旋共价闭合环状DNA（cccDNA）是乙肝病毒（HBV）复制的初始模板。血清内HBsAg的水平与cccDNA水平有一定相关性，HBsAg水平的下降不仅反映了cccDNA转录或mRNA转译的减少，同时也预示着宿主对HBV复制实现了免疫控制。因此，HBsAg水平是抗病毒治疗成功的早期指标，其下降速度和幅度可预测治疗的长期疗效。研究数据显示，对于低水平HBV DNA（＜2000 IU/ml）的患者，HBsAg水平是一个重要风险因素。

尽管HBsAg具有重要临床价值，但实际应用中仍面临诸多挑战。由于HBV复制周期快且聚合酶易错配，在内源性（宿主免疫清除）和外源性（疫苗和抗病毒药物）的选择性压力作用下，天然产生或经治疗诱导的前S/S基因组区域突变在慢性HBV感染患者中非常常见。HBsAg突变导致患者HBsAg检测结果为阴性，但其血清和（或）肝脏中仍存在HBV DNA，这种情况称为隐匿性HBV感染（OBI）。

高嘉宏教授指出：“OBI患者若作为献血者或肝移植供体，将会对输血和手术安全构成重大隐患。同时，HBsAg突变会加速隐匿性乙型肝炎向肝硬化/肝癌进展，并引发免疫抑制后的HBV再激活，导致检测试剂漏检、疫苗保护失败、抗病毒治疗失败等。因此临床需要更精准的检测，尽早发现这类患者。”

王露楠教授分享了一项针对中国献血者隐匿性乙肝S基因相关突变的血清学特征研究。研究显示，70.3%的样本HBV DNA定量结果＜20 IU/ml，仅有2.4%的样本HBV DNA定量值＞200 IU/ml；这些样本中最常见的血清学模式是抗HBc/抗HBe同时阳性和单独抗HBc阳性；OBI样本中最常见的基因型为B和C；92.24%的OBI样本发生了突变，高于HBsAg阳性菌株的突变情况。

王露楠教授表示：“OBI的发生与S基因突变有关，且OBI患者的突变率更高，这对实验室检测能力提出了新的挑战。血清学检测试剂的设计不仅要满足灵敏度和特异性，还要具备HBsAg突变检测的能力。传统的酶联免疫吸附试验（ELISA）的突变检测能力有待提高。目前结果显示，电化学发光法（ECL）具有优异的HBsAg突变检出能力。”

真实临床患者样本研究力证

Elecsys®HBsAg检测性能

会上，Mikael Gencay博士介绍了HBsAg突变全球多中心研究成果。该研究首次采用真实临床患者样本，纳入1553例来自非洲、亚洲、欧洲、美洲等全球不同流行地区且涵盖各种重要基因型的HBV感染患者样本，包括来自中国的407例HBV感染患者样本。

研究发现，超过70%的样本发生了HBsAg突变，且全球范围内不同流行地区及不同基因型中总体突变率无显著差异。其中，大部分中国患者样本为基因型C，而多位点突变频率在基因型 C感染的人群中更高。在中国样本中，还发现了136种特有的突变（全球共345种突变），10余种新的突变体（全球共62种）；在超过30%的中国患者样本中发现了47种位于“a”决定簇区域的特有突变，这是对于诊断及临床都非常重要的区域，可能与宿主免疫反应差有关，也可导致慢性HBV感染，还可导致假阴性诊断结果。此外，与G145R突变相关的疫苗及诊断逃逸在中国样本中的发生比例更高，为4%，而全球比例为2%。

研究还对4种HBsAg商业试剂（罗氏诊断Elecsys®HBsAg Ⅱ免疫检测、两种基于磁珠颗粒的HBsAg免疫检测、HBsAgELISA检测）进行了性能比较分析。Elecsys®HBsAgⅡ的灵敏度最高，达到99.94%；并成功识别出研究中所有（含突变体）的真实临床患者样本，证实了HBsAg突变对该试剂的检测性能没有影响。Mikael Gencay博士表示：“研究证明，HBsAg突变在HBV感染患者中非常常见，发生率比之前所报道的数据高出3倍。对存在大量HBsAg突变的患者，使用Elecsys®HBsAgⅡ免疫检测进行管理是非常安全、可靠的。”

Elecsys®HBsAgⅡ定性和定量检测试剂均采用独特的抗原抗体反应体系设计，并使用3种单克隆抗体和1种多克隆抗体的组合，能检测到目前所有已知的HBV血清型，并有利于提高HBsAg突变的检出能力，对于HBV感染的筛查、诊断和监测具有重要价值。